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293T-CD3mix-puro细胞株

【货号】AKD068A 【细胞名称】 293T-CD3mix-puro
【细胞类型】人肾上皮细胞 【过表达基因】CD3δ/CD3γ/CD3ε/CD3ζ
【包装规格】3x10^6 cell/管 【运输方式】干冰运输

产品名:293T-CD3mix-puro细胞

保存体系:液氮长期保存

培养条件:85%DMEM+10%FBS+5%DMSO

生长类型:贴壁生长

运输方式:冻存细胞干冰运输

复苏流程:

1.带上防护面罩及防冻手套,从液氮罐中取出细胞,并迅速放入37°C水浴锅中解冻。

2.细胞解冻后,通过传递仓将细胞传递至细胞房内。

3.在生物安全柜内,取出一只15mL无菌离心管,使用1mL移液器向15mL离心管内加入4mL 培养基。

4.使用75%的医用消毒酒精棉球仔细擦拭上述在37°C水浴锅中解冻的细胞冻存管外表面,进行表面消毒。在生物安全柜内,拧开细胞冻存管,然后用1mL移液器将管内的细胞悬液吸出,逐滴加入至上述准备的含有4mL培养基的15mL离心管中,将15mL离心管盖子旋紧,缓慢上下颠倒4次,使细胞悬液混匀。

5.将含有细胞悬液的离心管置于离心机中,设置离心参数如下:200xg、室温(~25°C)离心5分钟。

6.离心结束后,将离心管轻轻转移至生物安全柜中,此时细胞离心管底部可见白色细胞团。使用电动吸引器将培养基上清吸掉(细胞团比较松散,注意不要触及底部的细胞团)。

7.使用1mL移液器加入2mL完全培养基,轻轻吹打5次重悬细胞团,计数,接种。

8.将细胞放置培养箱中过夜培养。


企业微信截图_16080953208073.png

  图示说明:左图:使用APC-anti-CD3抗体(Biolegend,Cat#317318)检测CD3的表达;

右图:瞬时转染TCR表达质粒,使用PE荧光标记的四聚体HLA-A 02:01 HPV16 E7 Tetramer(MBL Cat#TB-0031-1)检测TCR的表达。