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Jurkat-NFAT-Luciferase-CD16

【货号】AKD063A 【细胞名称】 Jurkat-NFAT-Luciferase-CD16
【细胞类型】人外周血白血病T细胞 【过表达基因】NFAT/EGFP/CD16
【包装规格】3X10^6 cells 【运输方式】干冰运输

抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependentcell-mediatedcytotoxicity,ADCC),是抗体发挥作用的方式之一,当IgG抗体通过Fab段与靶细胞(病毒感染的细胞及肿瘤细胞)表面抗原决定簇特异性结合后,其Fc段可与有FcγR的杀伤细胞(NK细胞、单核-巨噬细胞、中性粒细胞)等效应细胞结合,触发效应细胞的杀伤活性,直接杀伤靶细胞(病毒感染的细胞及肿瘤细胞)。

ADCC作用是抗体药物杀伤靶细胞的理想机制,通过ADCC试验可验证单克隆抗体的抗肿瘤活性。早期ADCC验证方法多为基于新鲜制备的外周血单核细胞或NK细胞做为效应细胞的杀伤试验,但这些方法存在细胞分类和培养困难、操作繁琐、背景值高、且受个体差异影响等缺陷。

爱康得生物致力于肿瘤抗体药物的研发,为解决传统ADCC试验中常见的问题,我们以荧光素酶报告基因检测系统为平台,构建了稳定转染CD16受体和NFAT(Nuclear Factor of Activated T-cells)反应原件的Jurkat-NFAT-Luc-CD16细胞系。当抗体的Fab段与靶细胞上抗原结合以后,抗体的Fc段与效应细胞Jurkat-NFAT-Luciferase-CD16细胞表面的(FcγRIIIA)结合,引起Jurkat-NFAT-Luciferase(New)-CD16细胞内NFAT相关信号通路活化,进而导致荧光素酶表达水平上升。




产品名:Jurkat-NFAT-Luciferase-CD16

物种:人外周血白血病T细胞

保存体系:-80°C短期保存,液氮长期保存

培养条件:1640+20%FBS

冻存液:90% 1640+10%FBS

生长类型: 悬浮生长

运输方式:新鲜细胞常温运输,冻存细胞干冰运输

复苏流程:

1.带上防护面罩及防冻手套,从液氮罐中取出细胞,并迅速放入37°C水浴锅中解冻。

2.细胞解冻后,通过传递仓将细胞传递至细胞房内。

3.在生物安全柜内,取出一只15mL无菌离心管,使用1mL移液器向15mL离心管内加入4mL 培养基。

4.使用75%的医用消毒酒精棉球仔细擦拭上述在37°C水浴锅中解冻的细胞冻存管外表面,进行表面消毒。在生物安全柜内,拧开细胞冻存管,然后用1mL移液器将管内的细胞悬液吸出,逐滴加入至上述准备的含有4mL培养基的15mL离心管中,将15mL离心管盖子旋紧,缓慢上下颠倒4次,使细胞悬液混匀。

5.将含有细胞悬液的离心管置于离心机中,设置离心参数如下:200xg、室温(~25°C)离心5分钟。

6.离心结束后,将离心管轻轻转移至生物安全柜中,此时细胞离心管底部可见白色细胞团。使用电动吸引器将培养基上清吸掉(细胞团比较松散,注意不要触及底部的细胞团)。

7.使用1mL移液器加入2mL完全培养基,轻轻吹打5次重悬细胞团,计数,接种。

8.将细胞放置培养箱中过夜培养。