单域抗体(纳米抗体)定制服务

什么是单域抗体(纳米抗体)

单域抗体(纳米抗体)最早是由比利时科学家 Hamers 等1993 年在《Nature》首次报道。在羊驼外周血中存在一种天然缺失轻链的抗体,该抗体只包含一个重链可变区(VHH)和两个常规的CH2与CH3区,该抗体是已知的可结合目标抗原的最小单位。VHH晶体为2.5nm,长4nm,分子量只有15KD,因此也被称作纳米抗体(Nanobody或single domain antibody)。

单域抗体(纳米抗体)的优势与应用

由于单域抗体(纳米抗体)拥有更长的CDR3区(纳米抗体CDR3通常由16~24个氨基酸组成,传统单抗CDR3仅有7~12个氨基酸),所以这种长CDR3结构有利于单链抗体结合抗原分子的隐蔽抗原表位,这也是提高单链抗体与抗原结合能力的主要原因,同时导致其结构非常稳定,能够耐受高温及苛刻的极端环境。与普通的Y型抗体相比,纳米抗体结构简单,易于进行抗体工程改造,更适于改造成单价、双价、双特异及多价抗体。同时纳米抗体生产制备简便,可用传统的大肠杆菌表达体系进行制备,也可以使用酵母或哺乳动物细胞生产。纳米抗体与人抗体重链氨基酸序列高度相似,因此易于进行人源化改造,目前逐渐成为新一代治疗性生物医药与临床诊断试剂中的新兴力量。

单域抗体(纳米抗体)获得

为满足工业客户的需求,我们开发了基于Single B细胞克隆和酵母展示为基础的的纳米抗体筛选平台以满足不同客户的需求

技术路线一:基于Single B细胞克隆获得纳米抗体

ABexpressTM是我公司自主研发的抗体快速筛选平台,该方案通过流式分选PBMC中对靶蛋白具有特异性结合的B细胞,并对对单个B细胞进行抗体编码区域的测序最终获得抗体序列信息。这种方法适用于任意动物抗体筛选,可一次性覆盖全部靶向抗原特异性的B细胞,具有基因多样性好、效率高的特点;并可避免使用噬菌体库筛单克隆抗体过程中的假阳性,或非特异性结合等问题,可大大加速纳米抗体筛选的速度。

技术流程:

纳米抗体单个B细胞.jpg

技术路线二:基于酵母展示获得纳米抗体

噬菌体展示技术曾是获得纳米抗体序列的另一重要技术路径,但部分抗体无法正确的与噬菌体衣壳蛋白融合并展示出来,且噬菌体自身与靶蛋白的非特异性结合也会影响后续筛选工作的进行。为避免此类问题的产生,我们将纳米抗体展现于酵母表面,通过FACS分选阳性克隆后,通过测序可获得多样化的抗体序列。该方法可以极好的模拟所有纳米抗体在细胞膜表面的结构,正确的反应纳米抗体与抗原的结合情况,极少出现噬菌体展示库常见非特异性结合的情况。在开展多个纳米抗体筛选工作时,酵母展示库技术更具有成本上的优势。

技术流程:

酵母展示-1.jpg


  • PBMC处理

  • 抗体展示库制备

  • 抗体筛选和亲和力测定

  • 抗体功能鉴定

  • 20-26周交付

  • 目的基因信息

  • 重组蛋白

  • 重组抗体

  • 实验报告

0086-512-62570431

order@icartab.com